Nachweis von bakteriellem Endotoxin
Wir bieten Tests auf bakterielle Endotoxine an. Unsere Testmethoden erfüllen alle Anforderungen des Arzneibuchs (USP85, ChP1143), einschließlich der Gel--Gerinnsel-Endotoxintest-TAL- und LAL-Methoden. Wir bieten unseren Kunden auch Experimente zur Interferenzvalidierung und technische Unterstützung an.
Aseptische Untersuchung
Direktbeimpfungs- und Membranfiltrationsmethoden sind klassische Sterilitätstests für Produkte, die die Abwesenheit lebensfähiger kontaminierender Mikroorganismen sicherstellen sollen. Diese Tests werden in einer Isolator- oder Reinraumumgebung durchgeführt. Unsere Testmethoden erfüllen alle Anforderungen des Arzneibuchs (USP71, ChP1101).
• Testproben werden direkt in zwei Kulturmedien inokuliert, um aerobe und anaerobe Mikroorganismen nachzuweisen.
• Nach der Inokulation werden beide Kulturmedien 14 Tage lang inkubiert. Es werden intermittierende Beobachtungen und eine abschließende Beobachtung am Ende des Testzeitraums durchgeführt, um Hinweise auf mikrobielles Wachstum festzustellen.
• Das sterile, geschlossene Filtrationsgerät ermöglicht die gleichzeitige Filtration gleicher Testprobenvolumina durch zwei Membranfilter.
• Die Proben werden 14 Tage lang in zwei Kulturmedien inkubiert, um den Nachweis aerober und anaerober Mikroorganismen zu erleichtern.
Mykoplasmentests
Eine Kontamination mit Mykoplasmen ist ein häufiges Problem in der Zellkultur. Erschwerend kommt hinzu, dass Kontaminanten hohe Konzentrationen erreichen können, ohne Trübung oder zytopathische Effekte zu zeigen, was den Nachweis besonders schwierig macht. Zellsubstrate, die in der biopharmazeutischen Herstellung verwendet werden, müssen nachweislich frei von Zusatzstoffen, einschließlich Mykoplasmen, sein. Mykoplasmentests müssen in allen Phasen der Produktentwicklung durchgeführt werden, einschließlich Rohstoffen, Zellbanken, Virussamenbeständen, unverarbeitetem Erntegut und Endprodukten.
Direkte Kulturmethode
Testproben werden direkt auf Agarplatten/halbflüssige Medien und flüssige Medien inokuliert.
Die ausgewählten Agar-/halb{0}}flüssigen und flüssigen Medien haben nachweislich gute wachstumsfördernde Eigenschaften, die das Wachstum mehrerer Mykoplasmenarten unterstützen.
Jeder Mykoplasmen-Nachweistest umfasst Negativ- und Positivkontrollen, um die Eignung des Testsystems zu überprüfen.
Während der Inkubationszeit werden Flüssigkulturen zu mehreren Zeitpunkten subkultiviert, um das Mykoplasmenwachstum zu beobachten.
Am Ende der Inkubationszeit wird die Mykoplasmenkontamination durch Beobachtung des Vorhandenseins von Mykoplasmenkolonien auf Agarplatten oder einer Farbveränderung des flüssigen Mediums beurteilt.
Die gesamte Inkubationszeit beträgt 28 Tage.
Methode der Indikatorzellkultur
Einige Mykoplasmenstämme gelten als „nicht kultivierbar“, da sie in Standardkulturmedien nicht wachsen. Zur Anreicherung dieser Mykoplasmenstämme können Kulturen von Verozellen verwendet werden. Nach einer -wöchigen Kulturperiode werden die Zellen fixiert, mit DNA-bindenden Fluoreszenzfarbstoffen angefärbt und unter einem Mikroskop ausgewertet.
Bei einer Mykoplasmeninfektion erscheint bei starker Kontamination ein charakteristisches Muster heller Fluoreszenz auf der Zelloberfläche und der Umgebung.
Protein-, Peptid-, Vektor- und Plasmidprodukte reagieren besonders empfindlich auf Umweltfaktoren. Stabilitätsteststudien werden verwendet, um die Leistung biopharmazeutischer Produkte unter verschiedenen Umgebungsbedingungen innerhalb eines bestimmten Zeitrahmens zu bewerten. Anhand der Ergebnisse werden empfohlene Lager- und Transportbedingungen für Medikamente und Produkte ermittelt und geeignete Haltbarkeits- oder Wiederholungsfristen ermittelt.
Echtzeit- und beschleunigte Stabilitätstests
Die Haltbarkeitsdauer wird in der Regel auf der Grundlage der Ergebnisse von Echtzeit-Stabilitätstests und beschleunigten Stabilitätstests geschätzt. Bei Stabilitätstests in Echtzeit wird das Produkt unter empfohlenen Lagerbedingungen gelagert und kontinuierlich überwacht, bis es die Produktspezifikationen nicht mehr erfüllt. Bei der beschleunigten Stabilitätsprüfung wird das Produkt unter erhöhten Stressbedingungen (z. B. erhöhte Temperatur und/oder Luftfeuchtigkeit) gelagert. Der Abbau unter empfohlenen Lagerbedingungen kann dann anhand der bekannten Beziehung zwischen dem Beschleunigungsfaktor und der Abbauprofilrate vorhergesagt werden.
Studien zur erzwungenen Degradation
Studien zum erzwungenen Abbau werden durch Stabilitätsstudien unter extremen Lagerbedingungen durchgeführt, um die Abbauraten zu beschleunigen. Aufgrund der nicht-linearen Natur der Proteinabbaukinetik haben diese Studien einen begrenzten Vorhersagewert für die Haltbarkeit biopharmazeutischer Produkte. Studien zum erzwungenen Abbau sind jedoch besonders nützlich in der frühen Phase der Arzneimittelentwicklung, da sie Informationen über den Produktabbau und die Abbauwege liefern, eine Formulierungsoptimierung ermöglichen und bei der Bestimmung der Lagerbedingungen zur Kontrolle der Produktstabilität helfen.
Langzeitstabilitätsstudien.-
Für biopharmazeutische Produkte werden Langzeitstabilitätsstudien unter den erwarteten Lagerbedingungen durchgeführt, während Kurzzeitstudien bei höheren Temperaturen durchgeführt werden, um Stabilitätsbewertungen bei der Verwendung und unter Transportbedingungen zu unterstützen.